鞭毛染色液實驗過程中遇到的問題及方法
更新時間:2013-08-08 點擊次數:1326
玻片處理:將玻片用洗衣粉煮沸10分鐘,水洗,再用清潔液浸泡,加溫10分鐘,水洗,再放入95%酒精脫脂,同時取出涼干,可制成涂片.
染色液的配制:
20%的鞣酸溶液(加溫溶解)2毫升
鉀明礬飽和液2毫升
石碳酸飽和液5毫升
10%堿性復紅無水乙醇溶液1.5毫升
將上述各液混合后放置2-3日,過濾后備用,此液使用不得超大型過5周.
染色步驟:將細菌接種在瓊脂平板上,培養8-18小時,(35-37℃),用無水乙醇浸泡過的而且干燥的新玻片加一滴無菌DW,用接種環挑取菌落,置DW液面上,然后自然干燥.滴加染色液染1-2分鐘,水洗干后鏡檢.
結果:鞭毛染成紅色.
在實際鞭毛染色液膠體金實驗中遇到的問題及回答:
1)超過了判讀時間結果還準確嗎?
答:結果不準確,應按照說明書規定的時間判讀。如果到判讀時間為止,結果為陰性,判讀時間以后,出現淡淡的線條,可能是有色標記物持續釋放造成的,但是這種結果是無效的。
2)使用冰箱保存的標本和產品,應該注意什么?
答:若標本、試劑、緩沖液冷藏后,檢測前應把冷藏過包裝完好的檢測試劑、緩沖液放置空氣中復溫,冷藏或冷凍的標本檢測前也應復溫。如果沒有與室溫平衡即開始檢測,空氣中的水分遇冷凝集在沒有復溫的試劑上,導致產品受潮,可能影響測試結果。如果冰箱濕度較高,不建議開封過的筒裝產品在冰箱內保存。
3)樣品移行速度特別慢或無樣本跑動現象(在反應窗內不見有液體在膜上流動)
答:加入的標本量或全血加稀釋液的量不夠:重新試驗。
包裝袋破損或試劑失效:重新試驗。
從冷環境取出后沒復溫:重新試驗。
診斷試劑裝配不當:與供應商。
4)在反應窗內見到紅色豎線
答:當樣本在膜上流動時可能發生:該情況不會影響檢測結果,但保證背景清晰的情況下在規定時間內讀取結果。
可能使用了已溶血樣本:用新鮮標本重新測試。
5)規定的結果讀取時間時未見 C線?
答:加入的樣本量不夠:重新測試,按說明書要求加入足夠的樣本量。
加入的樣本量太多,導致產品流動不正常:按照說明書要求滴加樣本量。
樣本不流動,試劑有問題:與供貨商。
用血清血漿試劑檢測全血:用對應的標本檢測。
6)檢測后出現假陽性結果
答:血清/血漿樣本中含有特殊干擾物質:用另外的方法確診檢測結果。
在超過規定時間后讀取結果:不要在說明書規定讀數時間后讀取檢測結果。
7)檢測后出現假陰性結果
答:樣本中被檢樣本濃度低于檢測閾值:用其它檢測方法確認。
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