保存血清的方法
血清應(yīng)保存在-5C至-2OC。然而,若存放于4C時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2、解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生
3、請(qǐng)勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
5、若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56。C,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。
何謂熱滅活?
一般是以56C,30分鐘來處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37C環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保您血清的質(zhì)量!另外,購買已滅活成品也不失一個(gè)捷徑,請(qǐng)?jiān)谫徺I的時(shí)候注意詢問廠家是否是已滅活血清。
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